La potenza persiana dovette arrendersi davanti ad un'altra potenza nascente: l' Impero Macedone , che ad Isso infligge ai persiani la sconfitta definitiva.
Nel 332 a.C. Alessandro Magno entra in Palestina. Questo avvia un primo processo di ellenizzazione non forzato, a volte accolto a volte osteggiato, con la concessione di vivere secondo la Legge.
Alla morte di Alessandro nel 323 a.C., i suoi figli, tutti minorenni, eredi al trono vengono tutti assassinati.
Ad Alessandro subentrano tre generali, detti Diadòchi (successori), che si spartiscono l'Impero. La Palestina toccò al generale che si annesse l'Egitto e che diede origine alla dinastia dei Tolomei.